ꯕ꯭ꯔꯨꯁꯦꯂꯥ ꯑꯦꯟꯇꯤꯕꯣꯗꯤ ꯑꯦꯂꯤꯁꯥ ꯀꯤꯠ

ꯁ꯭ꯄꯦꯁꯤꯐꯤꯀꯦꯁꯟ ꯇꯧꯕꯥ

 

ꯇꯦꯁ꯭ꯇꯀꯤ ꯊꯧꯑꯣꯡꯁꯤꯡ & ꯏꯟꯇꯔꯞꯔꯤꯇꯦꯁꯟ .

 

ꯈꯣꯡꯊꯥꯡ ꯱ ꯇꯦꯁ꯭ꯠ ꯇꯧꯕꯒꯤ ꯊꯧꯑꯣꯡ

꯱.꯱ ꯋꯥꯁ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯁꯦꯝ ꯁꯥꯕꯥ .

Wꯑꯣꯔꯀꯤꯡ ꯀꯟꯁꯦꯟꯠꯔꯦꯁꯟ . wꯑꯦꯁꯤꯡ ꯂꯤꯛꯌꯨꯏꯗ: ꯱.ꯁꯤꯖꯤꯟꯅꯗ꯭ꯔꯤꯉꯩ ꯃꯃꯥꯡꯗꯥ, ꯋꯥꯁꯛ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯑꯗꯨ ꯔꯨꯝ ꯇꯦꯝꯄꯦꯔꯦꯆꯔꯗꯥ (20-25 ꯗꯤꯒ꯭ꯔꯤ ) ꯑꯃꯨꯛ ꯍꯟꯅꯥ ꯁꯦꯃꯖꯤꯅꯒꯗꯕꯅꯤ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯃꯗꯨ ꯌꯨꯅꯤꯐꯣꯔꯝ. ꯑꯣꯏꯍꯟꯅꯕꯥ ꯆꯥꯡ ꯃꯥꯟꯅꯅꯥ ꯁꯦꯡꯗꯣꯛꯀꯗꯕꯅꯤ ꯃꯗꯨꯒꯤ ꯃꯇꯨꯡꯗꯥ ꯁꯨꯡꯗꯣꯛꯠꯔꯤꯕꯥ ꯏꯁꯤꯡꯅꯥ ꯀꯟꯁꯦꯟꯠꯔꯦꯇꯦꯗ ꯋꯥꯁ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯑꯗꯨꯒꯤ ꯁꯔꯨꯛ 20 ꯍꯦꯟꯅꯥ ꯂꯨꯃꯒꯗꯕꯅꯤ (ꯈꯨꯗꯝ ꯑꯣꯏꯅꯥ, 5ml ꯀꯟꯁꯦꯟꯠꯔꯦꯇꯦꯗ ꯋꯥꯁ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯑꯗꯨ 95ml ꯁꯨꯡꯗꯣꯛꯠꯔꯤꯕꯥ ꯏꯁꯤꯡꯗꯥ ꯍꯥꯄꯆꯤꯜꯂꯤ), ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯗꯤꯜꯌꯨꯠ ꯇꯧꯔꯕꯥ ꯋꯥꯁꯛ ꯂꯤꯛꯌꯨꯏꯗ ꯑꯗꯨ ꯅꯨꯃꯤꯠ 7ꯅꯤꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ 2-8 ꯗꯤꯒ꯭ꯔꯤꯗꯥ ꯊꯃꯖꯤꯅꯕꯥ ꯌꯥꯏ,

꯱.꯲ ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯁꯦꯝ ꯁꯥꯕꯥ .

1 ꯑꯄꯨꯅꯕꯥ ꯑꯦꯅꯤꯃꯦꯜ ꯕ꯭ꯂꯗ ꯂꯧꯈꯤ, 4000rpmꯗꯥ ꯃꯤꯅꯤꯠ 10 ꯁꯦꯟꯠꯔꯦꯐ꯭ꯌꯨꯖ ꯇꯧꯈꯤ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯁꯨꯄꯔꯅꯦꯇꯦꯟꯇ ꯑꯗꯨ ꯈꯣꯃꯖꯤꯅꯈꯤ. ꯁꯦꯔꯥꯝ ꯑꯁꯤꯁꯨ ꯃꯍꯧꯁꯥꯅꯥ ꯍꯦꯃꯣꯂꯥꯏꯁꯤꯁ ꯌꯥꯎꯗꯅꯥ ꯀꯣꯒꯨꯂꯦꯠ ꯇꯧꯕꯥ ꯌꯥꯏ.

2 ꯁꯦꯝꯄꯂꯒꯤ ꯆꯥꯡ ꯑꯁꯤ ꯑꯆꯧꯕꯥ ꯑꯣꯏꯕꯥ ꯃꯇꯃꯗꯥ, ꯑꯦꯛꯁꯄꯤꯔꯤꯃꯦꯟꯇ ꯔꯤꯑꯦꯛꯁꯟ ꯃꯇꯝ ꯑꯁꯤ ꯂꯦꯞꯇꯅꯥ ꯂꯩꯕ꯭ꯔꯥ ꯍꯥꯌꯕꯗꯨ ꯌꯦꯡꯅꯕꯒꯤꯗꯃꯛ . ꯁꯦꯔꯥꯝ ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯑꯗꯨ ꯑꯦꯟꯇꯤꯕꯣꯗꯤ ꯋꯥꯔꯀꯤꯡ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯅꯒꯥ ꯂꯣꯌꯅꯅꯥ 1:1ꯗꯥ ꯗꯤꯜꯌꯨꯁꯟ ꯄ꯭ꯂꯦꯠ (70ul ꯁꯦꯔꯥꯝ ꯁꯦꯝꯄꯜ + 70ul ꯑꯦꯟꯇꯤꯕꯣꯗꯤ ꯋꯥꯔꯀꯤꯡ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ).ꯅꯦꯒꯦꯇꯤꯚ ꯀꯟꯠꯔꯣꯜ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯄꯣꯖꯤꯇꯤꯕ ꯀꯟꯠꯔꯣꯜ ꯑꯁꯤ ꯁꯦꯔꯥꯝ ꯁꯦꯝꯄꯜ.ꯒꯥ ꯃꯥꯟꯅꯩ꯫

꯱.꯳ ꯇꯦꯁ꯭ꯠ ꯇꯧꯕꯒꯤ ꯊꯧꯑꯣꯡ

1 ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯂꯦꯕꯦꯜ ꯃꯥꯏꯛꯔꯣꯞꯂꯦꯠ (ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯃꯁꯤꯡꯒꯤ ꯃꯇꯨꯡ ꯏꯟꯅꯥ, ꯗꯤꯁꯁꯦꯝꯕꯜ ꯇꯧꯕꯥ ꯌꯥꯏ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯀꯌꯥꯃꯔꯨꯝ ꯁꯤꯖꯤꯟꯅꯕꯥ ꯌꯥꯏ) ꯂꯧꯕꯥ, ꯅꯦꯒꯦꯇꯤꯕ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯄꯣꯖꯤꯇꯤꯕ ꯀꯟꯠꯔꯣꯂꯁꯤꯡꯒꯤꯗꯃꯛꯇꯥ ꯋꯦꯜ ꯑꯅꯤ ꯑꯃꯃꯝ ꯁꯦꯝꯕꯥ, ꯄ꯭ꯔꯤꯃꯤꯛꯁ ꯇꯧꯔꯕꯥ ꯃꯤꯛꯁꯆꯔ ꯑꯗꯨꯒꯤ 100UL ꯑꯁꯤ ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯂꯦꯕꯦꯜ ꯃꯥꯏꯛꯔꯣꯞꯂꯦꯠ.ꯗꯥ ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯑꯗꯨ ꯋꯦꯜ ꯑꯗꯨꯗꯥ ꯇꯞꯅꯥ ꯇꯞꯅꯥ ꯁꯣꯟꯊꯍꯅꯕꯥ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯃꯤꯅꯤꯠ 30ꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ ꯁꯤꯂꯤꯡ ꯄ꯭ꯂꯦꯠ ꯑꯗꯨ ꯀꯣꯅꯁꯤꯟꯅꯕꯥ ꯁꯤꯂꯤꯡ ꯄ꯭ꯂꯦꯠ ꯑꯗꯨ ꯁꯤꯖꯤꯟꯅꯗꯨꯅꯥ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯏꯅꯀꯨꯕꯦꯠ 30ꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ 30ꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ 30ꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ 30ꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ ꯏꯅꯀꯣꯠ ꯑꯗꯨꯗꯥ ꯌꯥꯎꯍꯅꯕꯥ꯫

2 ꯁꯤꯂꯤꯡ ꯄ꯭ꯂꯦꯠ ꯐꯤꯜꯃ ꯑꯗꯨ ꯍꯥꯡꯗꯣꯀꯎ, ꯄ꯭ꯂꯦꯠ ꯑꯗꯨꯗꯥ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯑꯗꯨ ꯀꯨꯄꯁꯤꯜꯂꯨ, ꯋꯦꯜ ꯈꯨꯗꯤꯡꯃꯛꯇꯥ ꯋꯥꯔꯀꯤꯡ ꯀꯟꯁꯦꯟꯠꯔꯦꯁꯟ ꯋꯥꯁꯤꯡ ꯂꯤꯛꯌꯨꯏꯗ 300μl ꯍꯥꯄꯆꯤꯜꯂꯨ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯃꯗꯨꯒꯤ ꯃꯇꯨꯡꯗꯥ ꯋꯦꯜ ꯑꯗꯨꯗꯥ ꯂꯤꯛꯌꯨꯏꯗ ꯑꯗꯨ ꯊꯥꯗꯣꯀꯎ. ꯃꯊꯛꯀꯤ ꯁ꯭ꯇꯦꯄꯁꯤꯡ ꯑꯗꯨ 5 ꯁꯨꯕꯥ ꯑꯣꯏꯅꯥ ꯍꯟꯖꯤꯟ ꯍꯟꯖꯤꯟ ꯇꯧ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯑꯔꯣꯏꯕꯗꯥ ꯁꯦꯡꯅꯥ ꯑꯦꯕꯁꯣꯔꯕꯦꯟꯇ ꯄꯦꯄꯔ ꯑꯃꯗꯥ ꯂꯦꯡꯗꯅꯥ ꯂꯩꯌꯨ.꯫

③Dꯏꯂꯨꯇꯦꯗ ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯀꯟꯖꯨꯒꯦꯠ ꯇꯧꯕꯥ ꯌꯥꯏ꯫:ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯀꯟꯖꯨꯒꯦꯠ (50×) ꯑꯁꯤ 50 ꯁꯨꯕꯥ ꯑꯣꯏꯅꯥ ꯂꯨꯄꯊꯣꯀꯎ (ꯈꯨꯗꯝ ꯑꯣꯏꯅꯥ: 20UL ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯀꯟꯖꯨꯒꯦꯠ ꯀꯟꯁꯦꯟꯠꯔꯦꯠ + 980UL ꯗꯤꯜꯌꯨꯑꯦꯟꯇ 1, ꯃꯊꯧ ꯇꯥꯕꯥ ꯑꯀꯛꯅꯕꯥ ꯁꯦꯅꯐꯝ ꯑꯗꯨ ꯇꯦꯁ꯭ꯠ ꯁꯦꯝꯄꯂꯁꯤꯡꯒꯤ ꯃꯁꯤꯡꯒꯤ ꯃꯇꯨꯡꯏꯟꯅꯥ ꯂꯦꯄꯊꯣꯀꯏ), ꯌꯥꯝꯅꯥ ꯐꯖꯅꯥ ꯃꯤꯛꯁ ꯇꯧ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯃꯊꯛꯇꯥ ꯊꯝꯃꯨ.

4 ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯀꯟꯖꯨꯒꯦꯠ 100μl ꯋꯦꯜ ꯈꯨꯗꯤꯡꯃꯛꯇꯥ ꯍꯥꯄꯆꯤꯜꯂꯨ, ꯄ꯭ꯂꯦꯠ ꯑꯗꯨ ꯀꯀꯊꯠꯂꯨ, ꯑꯃꯁꯨꯡ 37 ꯗꯤꯒ꯭ꯔꯤꯗꯥ ꯃꯤꯅꯠ 30ꯒꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ ꯏꯅꯀꯨꯕꯦꯁꯟ ꯇꯧ.

4 ꯋꯥꯁꯤꯡ ꯑꯦꯅꯖꯥꯏꯝ ꯄ꯭ꯂꯦꯠ, ꯑꯀꯛꯅꯕꯥ ꯑꯣꯄꯔꯦꯁꯟ ꯑꯁꯤ ꯃꯊꯛꯇꯥ ꯄꯅꯈ꯭ꯔꯤꯕꯥ 2. ꯑꯁꯤꯒꯥ ꯃꯥꯟꯅꯩ꯫

100μl ꯁꯕꯁ꯭ꯠꯔꯦꯠ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯑꯃꯥ ꯋꯦꯜ ꯈꯨꯗꯤꯡꯃꯛꯇꯥ ꯍꯥꯄꯆꯤꯜꯂꯨ, ꯄ꯭ꯂꯦꯠ ꯑꯗꯨ ꯀꯀꯊꯠꯂꯨ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯃꯩꯁꯥꯗꯒꯤ ꯗꯤꯒ꯭ꯔꯤ 37ꯗꯥ ꯃꯤꯅꯠ 10 ꯔꯣꯝ ꯊꯃꯒꯗꯕꯅꯤ.

1 50μl ꯁ꯭ꯇꯞ ꯁꯣꯜꯌꯨꯁꯟ ꯑꯃꯥ ꯋꯦꯜ ꯈꯨꯗꯤꯡꯃꯛꯇꯥ ꯍꯥꯄꯆꯤꯜꯂꯨ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯔꯤꯖꯜꯇ ꯑꯗꯨ ꯃꯤꯅꯠ 5ꯒꯤ ꯃꯅꯨꯡꯗꯥ ꯂꯦꯄꯊꯣꯀꯎ.

 

ꯈꯣꯡꯊꯥꯡ ꯲ꯒꯤ ꯔꯤꯖꯜꯇ ꯏꯟꯇꯔꯞꯔꯤꯇꯦꯁꯟ .

 

ꯋꯦꯜ ꯈꯨꯗꯤꯡꯃꯛꯀꯤ ꯑꯣ.ꯗꯤ.꯴꯵꯰ ꯚꯦꯜꯌꯨ ꯑꯁꯤ 96-ꯋꯦꯜ ꯃꯥꯏꯛꯔꯣꯞꯂꯦꯠ ꯔꯤꯗꯔ.ꯗꯥ ꯄꯥꯈꯤ꯫

꯲.꯱ ꯚꯦꯂꯤꯗꯦꯁꯟ ꯇꯧꯕꯥ .

 

ꯄꯣꯖꯤꯇꯤꯕ ꯀꯟꯠꯔꯣꯂꯒꯤ ꯆꯥꯡꯆꯠꯇꯥ ꯑꯣꯏꯕꯥ ꯑꯣ.ꯗꯤ.꯴꯵꯰ꯑꯦꯟ.ꯑꯦꯝ. ꯅꯠꯠꯔꯕꯗꯤ, ꯇꯦꯁ꯭ꯠ ꯑꯗꯨ ꯍꯟꯖꯤꯟ ꯍꯟꯖꯤꯟ ꯇꯧꯒꯗꯕꯅꯤ꯫

꯲.꯲ꯒꯤ ꯍꯤꯁꯥꯕ ꯇꯧꯕꯒꯤ ꯃꯑꯣꯡ .

ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯈꯨꯗꯤꯡꯃꯛꯀꯤ ꯑꯣꯏꯅꯥ, ꯀꯣꯔꯤꯑꯦꯛꯇ ꯇꯧꯔꯕꯥ ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯀꯟꯠꯔꯣꯜ ꯚꯦꯜꯌꯨꯁꯤꯡ ꯁꯤꯖꯤꯟꯅꯗꯨꯅꯥ ꯃꯈꯥꯗꯥ ꯄꯤꯔꯤꯕꯥ ꯃꯑꯣꯡ ꯑꯁꯤꯒꯤ ꯃꯇꯨꯡ ꯏꯟꯅꯥ PI (Blockingr ate) ꯑꯗꯨ ꯂꯦꯄꯊꯣꯀꯎ:

꯲.꯳ ꯔꯤꯖꯜꯇ ꯏꯟꯇꯔꯞꯔꯤꯇꯦꯁꯟ ꯇꯧꯕꯥ

PI < 20% ꯑꯣꯏꯕꯥ ꯃꯇꯃꯗꯥ, ꯃꯁꯤ ꯅꯦꯒꯦꯇꯤꯚ. ꯍꯥꯌꯅꯥ ꯂꯧꯏ꯫

PI > 30% ꯑꯣꯏꯕꯥ ꯃꯇꯃꯗꯥ, ꯃꯁꯤ ꯄꯣꯖꯤꯇꯤꯕ ꯑꯣꯏꯅꯥ ꯂꯧꯏ.

30%ꯗꯒꯤ ꯍꯦꯟꯅꯥ ꯅꯦꯝꯕꯥ ꯅꯠꯠꯔꯒꯥ ꯃꯥꯟꯅꯕꯥ PIꯗꯒꯤ 20% ꯍꯦꯟꯅꯥ ꯅꯦꯝꯕꯥ ꯅꯠꯠꯔꯒꯥ ꯃꯥꯟꯅꯕꯥ ꯃꯇꯃꯗꯥ, ꯃꯁꯤ ꯆꯤꯡꯅꯕꯥ ꯂꯩ ꯍꯥꯌꯅꯥ ꯂꯧꯏ, ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯅꯨꯃꯤꯠ ꯑꯃꯒꯤ ꯃꯇꯨꯡꯗꯥ ꯁꯦꯝꯄꯜ ꯂꯧꯕꯥ ꯑꯃꯁꯨꯡ ꯇꯦꯁ꯭ꯠ ꯇꯧꯕꯥ ꯍꯟꯖꯤꯟ ꯍꯟꯖꯤꯟ ꯇꯧꯅꯕꯥ ꯄꯥꯎꯇꯥꯛ ꯄꯤꯔꯤ.

ꯍꯠ ꯇꯦꯒꯁ: ꯕ꯭ꯔꯨꯁꯦꯂꯥ ꯑꯦꯟꯇꯤꯕꯣꯗꯤ ꯑꯦꯂꯤꯁꯥ ꯀꯤꯠ, ꯆꯥꯏꯅꯥ ꯕ꯭ꯔꯨꯁꯦꯂꯥ ꯑꯦꯟꯇꯤꯕꯣꯗꯤ ꯑꯦꯂꯤꯁꯥ ꯀꯤꯠ ꯁꯞꯂꯥꯏꯌꯔꯁꯤꯡ, ꯃꯦꯟꯌꯨꯐꯦꯀꯆꯔꯔꯁꯤꯡ, ꯐꯦꯛꯇꯔꯤ